包裝與品牌:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 品牌
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酵母質(zhì)粒DNA小量提取試劑盒 | 50次/100次 | 一研 |
產(chǎn)品介紹:
保存條件
RNase A:-20℃保存。RNase A為渾濁溶液。初次使用本試劑盒時(shí),請(qǐng)將RNase A全部加入到溶液Ⅰ中,均勻混合后于4℃保存??杀4?個(gè)月。
其他試劑:室溫保存。
若溶液YⅡ出現(xiàn)沉淀,請(qǐng)于37℃保溫溶解,待恢復(fù)至室溫后使用。沉淀的出現(xiàn)不會(huì)影響質(zhì)粒DNA的純化結(jié)果。
產(chǎn)品說(shuō)明
本產(chǎn)品采用了經(jīng)典的硅膠膜及堿裂法技術(shù),用于酵母質(zhì)粒DNA小量純化。純化原理是用溶壁酶消化酵母細(xì)胞的細(xì)胞壁,堿裂解酵母細(xì)胞后,硅膠膜柱高效可逆地吸附體系中的質(zhì)粒DNA(高鹽、低pH值),蛋白及其它雜質(zhì)不被吸附而被除去,被吸附的DNA在低鹽、高pH值條件下再被洗脫純化。一次可從1-5 ml(不超過(guò)5×107個(gè))的過(guò)夜培養(yǎng)的酵母菌液中純化高純度質(zhì)粒DNA(OD260/280 = 1.7-1.9),此質(zhì)粒DNA可直接用于DNA序列分析以及各種酶促反應(yīng)等。
注意事項(xiàng)
1 溶壁酶需要客戶另行購(gòu)買(mǎi)(貨號(hào):N9032、N9031)。
2 通常酵母質(zhì)??截悢?shù)都很低,一般通過(guò)電泳或者分光光度計(jì)法都很難檢測(cè)到。提取的質(zhì)粒DNA如用于下列實(shí)驗(yàn),通常建議使用量為:
用作PCR 模板:1–5μl質(zhì)粒DNA。
轉(zhuǎn)化大腸桿菌:5–10μl 質(zhì)粒DNA。
3 所有離心步驟均為使用常規(guī)臺(tái)式離心機(jī)室溫下進(jìn)行離心,速度為12,000 rpm(約13,400×g)。
4 所有離心步驟均為使用常規(guī)臺(tái)式離心機(jī)室溫下進(jìn)行離心,速度為12,000 rpm(約13,400×g)。
5 溶液 Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA片段可直接用于各種酶促反應(yīng)等,不會(huì)影響后續(xù)試驗(yàn)。
產(chǎn)品特點(diǎn)
高純度:OD260/280= 1.8-2.0。無(wú)須經(jīng)酚/氯仿抽提,可直接使用。
產(chǎn)品用途
PCR擴(kuò)增
轉(zhuǎn)化
注意事項(xiàng):
● RNA樣本保存液如出現(xiàn)沉淀,37℃加熱振蕩混勻。
● 加入RNA樣本保存液后,樣本不能立即置于-20℃或-80℃,要先4℃置放過(guò)夜,待組織充分浸潤(rùn)后再置于低溫保存。
● 樣品浸沒(méi)在RNA樣本保存液中,可在37℃保存1天,25℃保存1周,4℃保存1個(gè)月,-20℃長(zhǎng)期保存;使用時(shí)請(qǐng)注意保存時(shí)限。
● 保存在RNA樣本保存液中的樣本可不經(jīng)特殊處理,離心或直接使用和新鮮組織一樣的RNA提取方法提取RNA。
● RNA樣本保存液可以配合各種常見(jiàn)的RNA提取試劑盒使用,如東盛、invitrogen、omega等公司出品的RNA提取試劑盒,不影響試劑盒操作,不影響提取所得RNA質(zhì)量及其后續(xù)實(shí)驗(yàn)。