人ELISA試劑盒的實驗操作步驟

　　實驗想要順利進行，我們必須按步驟來進行，尤其是相關(guān)細節(jié)操作要重視。為了更好的進行人ELISA試劑盒的應(yīng)用，下面為大家詳細介紹一下人ELISA試劑盒的實驗操作步驟。

　　一、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：在小試管中進行稀釋。

　　二、加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣，待測樣品孔中先加樣品稀釋液，然后再加待測樣品。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

　　三、溫育：用封板膜封板后置室溫溫育半個小時左右。

　　四、配液：將濃縮洗滌液用蒸鐳水稀釋后備用

　　五、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置后棄去，如此重復(fù)幾次，拍干。

　　六、加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑，空白孔除外。

　　七、再按照上述步驟進行一次溫育和洗滌。

　　八、顯色：每孔先加入顯色劑，輕輕震蕩混勻，室溫避光顯色十五分鐘。

　　九、終止：每孔加終止液，終止反應(yīng)。

　　十、測定：以空白空調(diào)零，依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。