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轉(zhuǎn)基因元件CaMV35終止子LAMP試劑盒實驗步驟

發(fā)表時間:2022-09-21 14:11

轉(zhuǎn)基因元件CaMV35終止子LAMP試劑盒實驗步驟:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。

②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

BTBD6蛋白抗體

BMP內(nèi)皮細胞調(diào)節(jié)蛋白抗體

丙肝病毒NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8抗體

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p60TRP蛋白抗體

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短蛋白聚糖抗體

BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體

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堿性亮氨酸拉鏈蛋白BZW1抗體

骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B抗體

Bcl2相互作用蛋白1抗體(轉(zhuǎn)化相關(guān)基因8蛋白)

骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體

骨形態(tài)發(fā)生蛋白15抗體

Bcl-2樣蛋白2抗體

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Bcl-2抗體

腦轉(zhuǎn)錄因子4蛋白抗體

膽鹽激活脂肪酶抗體

3-羥丁酸脫氫酶抗體

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