大鼠芳香烴受體elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

大鼠芳香烴受體elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：

1加樣：

實(shí)驗(yàn)樣本過(guò)多時(shí)，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差；

加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；

作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。

2.溫育：

如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件；

用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察；

96孔板周?chē)着c中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水??；

3.洗板：

手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過(guò)猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；

洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；

為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；

實(shí)驗(yàn)流程:

1.實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；

2.加樣標(biāo)準(zhǔn)品及樣本50μL，37℃孵育30分鐘；

3.洗板5次，加酶標(biāo)試劑50ul，37℃孵育半小時(shí)；

4.洗板5次；加入顯色液A，B各50ul,37℃孵育顯色15分鐘

5.加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。

6.計(jì)算